康宁玲，赵秀文，张少雄，杨芳，丁金凤

• 1:中国医学科学院阜外心血管病医院

摘要(Abstract)：

本实验将人的尿激酶原（Ｐｒｏ－ＵＫ）ｃＤＮＡ导人体外培养的胎牛主动脉内皮细胞（ＥＣ），得到了表达该基因的转化细胞，以期覆盖血管内支架或小口径人工血管（＜４ｍｍ）等移植物达到防止血栓形成，提高移植物通畅率的目的。利用磷酸钙盐沉淀法将重组逆转录病毒载体ｐＮ２－ＣＭＶ·ＵＫ导人包装细胞ＰＡ３１７，获得了含有重组逆转录病毒（Ｐｒｏ－ＵＫＲＮＡ序列）的培养上滑。用机械刮取胎牛主动脉内腔面分离ＥＣ，进行常规培养。用重组逆转录病毒感染７代以内的牛ＥＣ，并经Ｇ４ｌ８筛选得到抗性细胞。Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析表明ＰｒｏＵＫｃＤＮＡ已整合进ＥＣ基因组。以鼠抗人的Ｐｒｏ－ＵＫ单克隆抗体为一抗，作细胞免疫组化分析（Ｌ５Ａ８法），抗性细胞胞浆中出现阳性棕色颗粒，对照细胞为阴性结果。溶圈实验测得尿激酶原分泌量约为２３Ｕ／１０６细胞／２４小时。上述结果证明人Ｐｒｏ－ＵＫｃＤＮＡ已整合入牛ＥＣ基因组，表达产物具有免疫活性和纤溶酶原激活作用。

关键词(KeyWords)： 尿激酶原cDNA，逆转录病毒，内皮细胞

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 卫生部基金

作者(Author): 康宁玲，赵秀文，张少雄，杨芳，丁金凤

参考文献(References)：

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